Materiales y Metodos
Olivos al microscopio
II(2022): Reproducción.
Materiales y Metodos Olivos al microscopio
II(2022): Reproducción. |
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Como ya hemos indicado uno de nuestros objetivos es poner a disposición del profesorado técnicas que puedan realizarse con materiales caseros. Aunque en las páginas anteriores se muestran algunos detalles hemos creído conveniente crear una página en la que se detallen todos los aspectos necesarios para su realización. A continuación mostraremos imágenes y explicaciones de las mismas junto con un enlace a un documento PDF que recoge, a modo de cuaderno de laboratorio, todas las técnicas y experiencias realizadas. Todos los materiales han sido adquiridos en comercios de la localidad, salvo el formol que lo compramos en Amazon.
Fijación/inclusión en resina de poliéster.
Para poder cortar, o en nuestro caso reducir el
grosor mediante el lijado, es necesario que el material biológico esté
embebido en un medio de cierta dureza, como es la parafina o en nuestro caso
la resina de poliéster. Para ello son necesarios los siguientes pasos:
Obtención de preparaciones.
Otras técnicas.
Preparación del epicarpo de la aceituna mediante ebullición.
Para facilitar el desprendimiento del epicarpio podemos sumergir las aceitunas en agua hirviendo. El sistema no es tan fácil ni tan rápido como en el tomate, pero permite despegar porciones de epicarpio de tamaño aceptable que pueden visionarse directamente sobre un porta. El material tiende a enrollarse por lo que puede ser conveniente dejarlo secar entre dos portas si queremos montarlo con laca o cualquier medio de montaje.
Pegado directo con pegamento rápido.
Los materiales duros, como el hueso de aceituna, pueden montarse directamente sobre el porta. Para hacerlo debemos lijar y pulir la cara que vayamos a pegar y una vez pegada reducir hasta el grosor deseado mediante lijas de agua. En nuestro caso hemos englobado la muestra pegada con pegamento de dos componentes para reforzar la muestra para el lijado y pulido final.
También hemos probado con
materiales blandos como flores o mesocarpio de aceitunas. Para el mesocarpio
cortamos la aceituna con un cuchillo afilado y echamos sobre la superficie del
corte pegamento instantáneo. El pegamento impregna la pulpa y cuando
seca permite tratar la zona endurecida como si hubiésemos realizado una
inclusión. Los resultados no son buenos pero permiten obtener algunas
imágenes de forma muy fácil.
Observación de tubos polínicos.
En general pensamos que el grano
de polen es un gameto, pero en realidad tanto el grano de polen como el saco
embrionario son “plantas” denominadas gametofitos que forman parte
del ciclo reproductor. Nuestra intención es explicar en detalle como
el grano de polen genera un tubo que conducirá el material genético
hasta el gameto femenino. Queremos conseguir imágenes de granos de polen
germinados in vitro, para observar el tubo polínico, si bien es verdad
que el proceso es algo complicado y no sabemos si podremos ponerlo a punto.
Como en la fase preparatoria (marzo y abril) no
encontraremos con facilidad flores de olivo pensamos iniciar el estudio con
jazmines, otra planta de la familia de las oleáceas. Las condiciones
de aislamiento en casa ocasionadas por el decreto del "Estado de Alarma"
nos dificultan de momento obtener flores de jazmín, por lo que realizaremos
los ensayos previos sobre polen de tulipán de nuestro jardín,
que presenta un grano de polen ligeramente mayor que el de olivo.
En los ensayos previos nos hemos encontrado con dos problemas:
1. Preparación de un medio de cultivo adecuado, constituido por compuestos
de fácil adquisición.
2. Concentración de granos de polen tras su inmersión en el medio
de cultivo.
Para las primeras observaciones hemos utilizado una disolución acuosa de sacarosa y hemos concentrado los granos de polen por decantación y centrifugación casera que podemos ver en las siguientes imágenes. Para ver el proceso en detalle puede consultarse el documento de materiales y métodos, que citábamos anteriormente.
 Materiales utilizados en la fijación. |
 Moldes de alumninio empleados para la inclusión. |
 Es aconsejable incluir un número en cada bloque para identificar las muestras. |
 Si queremos evitar los olores de los bloques que acabemos de polimerizar en el horno podemos encerrarlos en un frasco de vidrio. |
 Horno de cocina con un bote en cuyo interior hay un bloque sin polimerizar totalmente. |
 Si queremos evitar los olores de los bloques durante su polimerización podemos encerrarlos en un recipiente hermético. |
 Desmoldado y preparación de la pieza. |
 Recorte final y pegado al porta. |
 Proceso completo |
 Lijado y pulido final.(II) |
 Lijado y pulido final.(III) |
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 Hueso inmaduro. |
 Semilla |
 Hueso maduro |
 Msocarpio. |
 Mesocarpio |
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 Endocarpio inmaduro. |
 Pétalo |
 Pétalo |
Otras
técnicas. |
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 Decantación |
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 Comparativa centrifugado. |
 ¿Tubo polínico? |
 Casos dudosos |
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